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202001-11
分子間互作的5大實驗方法:①蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì) ②蛋白質(zhì)-RNA ③蛋白質(zhì)-DNA ④蛋白質(zhì)-DNA/RNA ⑤RNA-DNA 一、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì) 1.免疫沉淀(IP) 2.免疫共沉淀(co-IP) 3.GST pull-down ……
IP 是利用抗體特異性反應富集純化目的蛋白的一種方法,可用于目的蛋白的定性和定量分析。 1 IP 研究基礎 2 IP原理 ①IP 結合原理 IP是利用抗原蛋白質(zhì)和抗體的特異性結合以及細菌蛋白質(zhì)的“protein A/G”特異性的結合到抗體(免疫球蛋白)的Fc片段的現(xiàn)象開發(fā)出來的方法。 ②IP 分離原理 3 IP 實驗流程 4 IP 實驗實施
Co-IP:研究的是體內(nèi)自然狀態(tài)下的蛋白質(zhì)互相作用,不能顯示蛋白質(zhì)之間的相互作用是直接還是間接的。 IP:根據(jù)抗原和抗體的特異性結合,利用抗體將靶標蛋白分離或純化,檢測某一種蛋白的表達情況。 2、Co-IP簡單介紹 3、Co-IP 原理 ProteinA/G ProteinA/G 能特異性地結合到免疫球蛋白的 FC 片段,因此能和抗體結合捕獲復合物,而抗體與目標蛋白結合,目標蛋白和相互作用的蛋白結合。 X代表復合物。
酵母感受態(tài)細胞的制備及質(zhì)粒的轉化 (1) 抽提BD和AD的相關質(zhì)粒(濃度最好在100-200ng/μL); (2) 預先灌制好需要的平板及各種培養(yǎng)基; (3)酵母感受態(tài)的制備: 1)將酵母菌株(AH109或者是其他的菌株)在YPDA培養(yǎng)基平板上劃線,30℃倒置培養(yǎng)3天左右,直到克隆大小為2-3m……
ZSCI國家自然科學基金項目查詢系統(tǒng)】 (V2.0正式版) 該系統(tǒng)從11月上線到現(xiàn)在,我們的程序猿小哥又對系統(tǒng)做了一些優(yōu)化,國家自然科學基金項目查詢V2.0正式版正式免費開放上線了。 2.0版本更新內(nèi)容:(基礎功能不變) ①增加學科熱度比例; ②增加各類統(tǒng)計分析、整體性分析,分析更加完善; ③電腦端增加【國自然基金委項目綜合查詢系統(tǒng)】、【科學網(wǎng)基金項目查詢系統(tǒng)】、【ZSCI文獻數(shù)據(jù)庫】、【國自然撰寫工具包】4個友情鏈接。 ④優(yōu)化系統(tǒng)頁面細節(jié); ⑤優(yōu)化手機端的
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