Label-free:無標(biāo)簽標(biāo)記的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究,依賴于繁雜的信息分析完成定量過程,主要有兩種:信號強(qiáng)度和譜圖計(jì)數(shù)法[1]。前者根據(jù)一級質(zhì)譜相關(guān)的肽段峰強(qiáng)度(Mass spectral peak intensity)、峰面積(Peak area)、液相色譜保留時(shí)間(LC retention time)等信息進(jìn)行定量分析;后者根據(jù)二級質(zhì)譜相關(guān)的每個(gè)蛋白鑒定到的肽段總次數(shù)(Peptide hide或Spectral counts)、所鑒定肽段的離子價(jià)位(Ion counts of identified peptides)等信息進(jìn)行定量分析。定量原理見下圖:
技術(shù)特點(diǎn)
無標(biāo)記:克服標(biāo)記樣本的局限性,可研究大規(guī)模樣本
數(shù)據(jù)要求高:基于高實(shí)驗(yàn)重復(fù)性,得到準(zhǔn)確結(jié)果
定量方法:基于信息分析進(jìn)行差異蛋白定量
數(shù)據(jù)量大:信息分析要求高
信息分析內(nèi)容
數(shù)據(jù)產(chǎn)出統(tǒng)計(jì)
蛋白質(zhì)鑒定結(jié)果
蛋白質(zhì)定量結(jié)果
蛋白質(zhì)GO分析
蛋白質(zhì)COG分析
蛋白質(zhì)Pathway代謝通路分析
差異蛋白GO富集分析
差異蛋白的Pathway富集分析
重復(fù)性分析(僅針對有重復(fù)設(shè)計(jì)的項(xiàng)目)
多樣品間表達(dá)模式聚類(適用于樣本數(shù)≥3的項(xiàng)目)
定制化信息分析
蛋白質(zhì)組與轉(zhuǎn)錄組關(guān)聯(lián)分析
參考文獻(xiàn)
[1] Zhu W, J.W. Smith, and C.M. Huang. Mass spectrometry-based label-free quantitative proteomics.J BIOMED BIOTECHNOL. 2010; 2010: p. 840518.