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科技服務

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膠點鑒定

利用MALDI-TOF/TOF技術鑒定雙向電泳中指定的膠點(考染、銀染或DIGE)或單一純化蛋白樣品。

 

技術特點 

基礎類產品:適用于低復雜樣本,為2D gel研究提供結果。

檢測速度迅速:UltrafleXtreme平臺的TOF和TOF/TOF模式,其采樣速度可達1 kHz。

動態范圍:對低豐度蛋白具有較好的檢測結果,可達到ng級別的鑒定能力。 

信息分析內容

數據產出統計

蛋白質鑒定結果

技術流程

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樣本要求

蛋白含量≥50pmol,膠點直徑≥1.0mm??既净蜚y染染色肉眼可見,銀染膠不能使用戊二醛進行顯色,且保證在電泳后一周內進行切膠送樣。

含鹽量:揮發性無機鹽

 

質譜平臺

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UltrafleXtrem, Bruker

繪制水稻胚胎的蛋白質譜

Proteomics study of rice embryogenesis: Discovery of the embryogenesis-dependent globulins

Electrophoresis. 2012 Apr;33(7):1129-38. doi: 10.1002/elps.201100398. 

研究內容:

植物胚胎是種子的生發中心,通過2D gel +MALDI-TOF-TOF技術鑒定水稻胚胎形成時期蛋白表達變化趨勢,有助于闡明胚胎發生的分子機制。

研究路線

樣本:提取水稻授粉后不同時期(6d,12d,18d)的胚胎蛋白

技術:2D gel + MALDI-TOF/TOF

 

研究結果:

共有66個膠點在胚胎形成時期被調控,其中通過MALDI技術鑒定到53個點。

鑒定到的蛋白被注釋到多個功能條目中,如儲存、胚胎發育、脅迫應答、糖酵解以及蛋白代謝。

大部分差異蛋白都來源于3種球蛋白,通過WB、蛋白水解、非變性膠電泳等驗證方法顯示球蛋白多態性是由蛋白水解造成,初步推測這些球蛋白在胚胎發育過程中發揮分子伴侶的作用。