酶聯接免疫吸附劑測定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay，ELISA)是一種結合抗原、抗體特異性反應和酶對底物高效催化作用的高敏感性免疫學實驗技術。ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應，洗滌使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開，再加入酶標記的抗原或抗體，通過反應使其結合在固相載體上。此時固相上的酶含量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。

樣本要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后、離心20分鐘左右(2000-3000 轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成、應再次離心。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑、混合10-20分鐘后、離心20分鐘左右(2000-3000 轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 

3. 尿液:用無菌管收集、離心20分鐘左右(2000-3000 轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成、應再次離心、胸腹水、腦脊液參照此實行。 

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時、用無菌管收集、離心20分鐘左右(2000-3000 轉/分)、仔細收集上清。 

5. 培養細胞:檢測細胞內的成份時、用PBS(PH=7.2～7.4)稀釋細胞懸液、細胞濃度達到100 萬/ml左右、通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑、以使細胞破壞并放出細胞內成份、離心20分鐘左右(2000-3000 轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 

6. 組織標本:切割標本后、稱取重量、加入一定量的PBS、PH=7.4。用液氮迅速冷凍保存備用、標本融化后仍然保持2-8℃的溫度、加入一定量的PBS(PH=7.4)、或組織蛋白萃取試劑、用手工或勻漿器將標本勻漿化、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、分裝后一份待檢測、其余冷凍備用。
實驗流程

交付結果

原始OD值
數據分析結果